懸浮細胞如何固定做免疫熒光等后續實(shí)驗？

懸浮細胞呈現懸浮狀態(tài)生長(cháng)，如何固定？是所有后續實(shí)驗的第一步，也是關(guān)鍵的一步，也是難倒很多人的的一步。靶點(diǎn)科技懸浮細胞專(zhuān)用固定玻片Shi-Fix，提供全新的痛點(diǎn)解決方案。L-多聚賴(lài)氨酸等傳統老掉牙的作坊式方法被詬病，被淘汰。

您是否希望懸浮細胞的免疫熒光像貼壁細胞一樣容易？現在就是這樣！靶點(diǎn)科技Shi-Fix懸浮細胞免疫熒光專(zhuān)用玻片直擊痛點(diǎn)。

細胞免疫熒光主要用于蛋白定位研究，相互作用研究和細胞信號轉導研究。細胞免疫熒光就是將免疫學(xué)方法和熒光標記技術(shù)相結合，研究特異性抗原在細胞內的分布。細胞免疫熒光特性高，敏感性強，速度快，主要原理也是利用抗原抗體反映抗原抗體結合后再用熒光標記，通過(guò)顯微鏡下觀(guān)察來(lái)確定某種特異性抗原是否存在。

根據培養的細胞類(lèi)型，可分為貼壁細胞和懸浮細胞（淋巴細胞，血液的白細胞）。貼壁細胞有天然貼壁的屬性，而懸浮細胞不依賴(lài)支持物表面，在培養液中呈懸浮狀態(tài)生長(cháng)。

免疫熒光實(shí)驗的基礎前提就是讓細胞能固定在玻片上。懸浮細胞如何貼壁或者固定到玻片上，是業(yè)內科研人員面對的一個(gè)難題。傳統上，或用細胞離心甩片機制備細胞片或直接涂片法制備細胞涂片，然后把細胞片于乙醇或丙酮或多聚甲醛固定。無(wú)論甩片還是涂片，都是黑盒子實(shí)驗。每個(gè)人操作手法不一樣，即使同一個(gè)人操作，每一批實(shí)驗，也都沒(méi)法評價(jià)細胞片上的細胞固定的情況，而這一步至關(guān)重要。盲目而又沒(méi)底的只能硬著(zhù)頭皮往下做。浪費的不僅是時(shí)間，還有抗體等很多試劑。如何解決這些痛點(diǎn)？懸浮細胞免疫熒光專(zhuān)用玻片Shi-Fix Coverslips帶來(lái)痛點(diǎn)解決方案！

您是否希望懸浮細胞的免疫熒光像貼壁細胞一樣容易？現在就是這樣！

靶點(diǎn)科技Shi-fix玻片允許懸浮細胞分層或直接作為單層生長(cháng)。簡(jiǎn)單，無(wú)憂(yōu)的實(shí)驗方案，無(wú)需離心即可將懸浮細胞固定到載玻片上。只需將細胞添加到載玻片上，等待30分鐘，用PBS洗滌未結合的細胞并繼續免疫染色（或繼續培養以獲得所需的細胞密度）。

這些玻片也可用于染色懸浮細胞以進(jìn)行顯微鏡檢查，或用于固定懸浮細胞以進(jìn)行共聚焦顯微鏡檢查。更重要的是，如果需要，您還可以在細胞附著(zhù)在玻片上時(shí)刺激它們。您可以像貼壁細胞一樣處理非貼壁細胞！

簡(jiǎn)單四步法固定懸浮細胞

1. 使用 PBS 清洗細胞，并將細胞重新懸浮于 PBS 中(2-5 百萬(wàn)個(gè)/ml)

2. 把懸浮細胞專(zhuān)用免疫熒光玻片放置于12孔或者6孔細胞培養板孔里，直接滴加細胞于懸浮細胞專(zhuān)用免疫熒光玻片上(每個(gè)玻片上 20-30 萬(wàn)個(gè)細胞)

3. 使細胞附著(zhù)30分鐘，有些細胞需要延長(cháng)附著(zhù)時(shí)間，但不要超過(guò)1小時(shí)。使用約 2ml PBS沖洗掉未結合細胞(切勿直接垂直滴加PBS到玻片上的細胞，可將 PB滴加于板孔側邊，然后輕輕搖晃 3-5分鐘)

4. 在顯微鏡下檢查細胞附著(zhù)情況，如果需要進(jìn)一步培養，那么加入 1ml培養基即可;若不培養即可直接固定，染色。

懸浮細胞固定免疫熒光圖